Kommentar: Zevill Stimulatioun… an dësem Fall mat Amphetamin, wat Dopamin [D1] Rezeptoren iwwerschwemmt… betrëfft d'Bindebindung a monogame Volen.
Editéiert vum Leslie Lars Iversen, Universitéit vun Oxford, Oxford, Vereenegt Kinnekräich, an huet den 10. Dezember 2009 guttgeheescht (fir Iwwerpréifung 21. Oktober 2009)
mythologesch
D 'Prärievel (Microtus ochrogaster) ass eng sozial sozial monogam Staangkarussell, déi Paartbonden no der Pabeier bilden, e Verhalen an deem d'Zentral Dopamin (DA) implizéiert ass. Hei hu mir männlech Prärieholle benotzt fir d'Effekter vun der Drogendexpositioun op Paarverkleedung an der relational neuralem Schaltkreesser ze iwwerpréiwen. An eisen éischte Experiment gouf d'Bewegung vum Amphetamin (AMPH) motivéiert mat engem konditionéierte Plazpräferenz (CPP) Paradigma gepréift a gouf duerch d'Aktivatioun vun D1-ähnlechen DA-Receptoren vermittelt. Als nächst hu mir d'Effekter vun der wiederholter AMPH Expositioun op Paart Bonding un iwwerpréift. Déi intakt an Salzlinn-préprotéiert Kontrollzäiten hu matenee indirekte Partnerpräferenzen, während Männer mat AMPH bei den Dosen effektiv fir d'CPP z'ënnerstëtzen, keng portugiséierend Partnerpräferenzen ze gesinn. Dës AMPH-Behandlung huet och D1 erhéicht, awer net D2, DA Rezeptor Ausdrock am Nukleus accumbens (NAcc). D'pharmakologesch Blockade vun D1-ähnlechen DA-Rezeptoren an der NAcc huet gerett ginn indirekt Partnerpräferenzen an AMPH-behandelt Männer. Zesumme mat eise Daten weisen datt d'Wiederhuelung vun der AMPH exposéiert d'Verhalensrepertoire vu männlechen Prärievelen iwwer engem DA-Rezeptor-spezifesche Mechanismus an der NAcc huet, wat zu der Behënnerung vun der Paarmroun forméiert gouf.
Et ass allgemeng akzeptéiert datt motivéiert an emotional Verhalen, déi d'Fitness förderen, duerch Hirnhéijungskonstruktioun geregelt, dorënner d'mesolimbic Dopamin (DA) System reglementéiert (1, 2). Obwuel dëst System oft an der Ernährung an der sexueller Behorf (3, 4), huet se och an engem anere natierleche ville motivéierte Verhalens involvéiert, wéi z. B. sozialt Spill tëscht Juvenile a sozialen Obligatioun tëschent Elterendeel a Nofolger (5-9). Oft Ënnerprézesséiert an der Fuerschung sinn déi sozial Obligatiounen, déi tëscht erwuessenen Partner geschwat ginn, dh Paire Obligatiounen. Déi lescht Untersuchung mat enger sozial monogam Staangkarussell, de Präriefaarf (Microtus ochrogaster) (10-12), weisen datt e groussen Deel vun der neurorientéierter Regulatioun, déi de Paar Bunnenbildung an Ënnerhalt iwwerlagert, an der Nukleus accumbens (NAcc) geschitt (13-15) -A mesolimbic Gehirregregioun kritesch fir de mediéierte motivéierte Behuelen (1, 2, 16).
Obwuel d'Motivatiounskonstruktioun entstanen ass fir e Fitness ze verbesseren Verhalen wéi Fütterung, Paart a sozialen Bannmëttel (1, 17), et ass vulnerabel fir kierperlech Usurpatioun duerch Drogen vu Mëssbrauch (8). Zum Beispill d'Verwaltung psychostimulante Drogen vu Mëssbrauch, wéi Kokain a Amphetamin (AMPH), entstinn a beständeg Ännerungen vu mesolimbic DA Aktivitéit (18, 19). Déi intensiv Auswierkunge op dës Kreesch vun dësen an aner Suchtproblemer gouf virgeschloen de Wäert vun natierlechen Ureiz ass (20), ënnert anerem déi vun enger sozialer Natur (8). Obwuel et bekannt ass datt Drogenarkten Affekotesch sozial Behuelen (21), d'neuresch Regulatioun vun Interaktiounen tëschent Drogenerfahrung a sozialem Uschloss ass schlecht verstanen. Dëst ass, wëll Deel vun dësen Interaktiounen si schwéier an de traditionnelle Labour Nerven ze modelléieren déi keng sozial Bindungen tëschent erwuessenen Appropriaten hunn.
D'Neurobiologie vu soziale Bezuchspersoun, speziell Paarzbindung tëscht Erwuessener, ass extensiv an der Prärie Vole studéiert (10-12), a viru kuerzem gouf dës Arten als e praktescht Modell fir d'Motivatiounswäert vun den AMPH (22). Ausserdeem ginn déi zwou Paarte Bond-Formatiounen an d'AMPH-Verstärkung vermëttelt, zumindest deelweis, duerch Transmissioun an der NAcc (14, 15, 23). Dofir huet déi aktuell Studie de Prärie-Vole-Modell benotzt fir e Verhaltensassay z'ënnerstëtzen, fir d'Effekter vun der Drogenentzündung op sozialem Bonding ze studéieren an am SRC-Signalsystem ze fokusséieren, fir en Verwierkungsmechanismus déi neurologesch Mechaniséierung ze verëffentlechen.
Resultater
AMPH-Induktiv Conditioned Place Preference (CPP) gëtt Mediéiert vu DA an engem Receptor-spezifesche Manner.
D'Formation vun enger CPP gouf definéiert duerch e wesentlechen Zuel vun der Vergaangenheet am AMPH-Paarage während dem Posttest, nom 3 Deeg vun der AMPH Konditionéierung, relativ zum Prestest. Weder Salzsinjektioune ni Salin enthalen déi zwou ënnescht Dosen vun AMPH gepréift (0.1 a 0.5 mg / kg) verännert Käfegpräfératiounen (Figebam. 1A). Allerdéngs sinn Männer mat méi héicht Dosen vun AMPH, ënner anerem 1.0 (t = 2.87, P <0.01), 3.0 (t = 3.63, P <0.01), oder 5.0 mg / kg (t = 3.03, P <0.01), ugewisen CPP (Figebam. 1A).
Figur. 1.
(A) Männer, déi ip Injektioune vu Salzlinn oder déi niddreg Dosen vun AMPH (0.1 oder 0.5 mg / kg) während 3 Deeg Konditioune kréien, hunn de CPP net gewisen. Wéi och ëmmer, Männercher bedénge mat AMPH bei méi héijen Dosen (1.0, 3.0, a 5.0 mg / kg) verbréngen däitlech méi Zäit an der konditionéierter Käfig am Posttest wéi d'Preestest. (B) Fir d'Roll vun DA Rezeptoren an AMPH-induzéierter CPP ze testen, goufen Männercher mat entweder Salins oder mat verschiddenen Dosen vun engem nonselektiven DA Rezeptor Antagonist (Haloperidol), D1-ähnlechen Rezeptor Antagonist (SCH23390), oder D2-ähnlechen Rezeptor Antagonist (Eticlopride) getest ) virun AMPH Injektiounen während 3 Deeg Konditioun. D'Injektiounen vu Salzlinn oder niddreg Dosen Haloperidol hunn d'AMPH-induzéiert CPP net geännert. Wéi och ëmmer, haloperidol Injektioun bei 5.0 mg / kg blockéiert AMPH-induzéiert CPP, beweist eng Bedeelegung vun DA Rezeptoren an AMPH-induzéierter CPP. Des Weideren hunn Injektiounen vum D1-ähnlechen Antagonist souwuel déi niddreg an héich Dosen, awer net den D2-ähnlechen Antagonist, AMPH-induzéiert CPP blockéiert, a weist e Rezeptor-spezifeschen DA Reguléierung vun AMPH-induzéierter CPP. *P <0.05, **P <0.01.
Well AMPH wesentlech erhéicht DA Neurotransmission an Prärievolen (24), a DA vermëttelt AMPH Verstärkung an aner Arten (23), mir nächst Cheffen vun der Receptor (DAR) vun der AMPH induzéiert CPP bei männlechen Prärievolen. D'Subjeten goufen an der CPP Paradigma ënnersicht, déi entweder mat Salz oder Salze behandelt ginn, déi ënnerschiddlech DOS-Antagonisten (Haloperidol) vir AMPH (1.0 mg / kg) Injektiounen behandelt ginn an duerno bei CPP an engem Posttest getest. Themaen mat Salzlinn behandelt (t= 2.69, P <0.01) oder Salzléisung mat den zwou nidderegsten Dosen Haloperidol (0.1 mg / kg; t = 3.62, P & Si besteet; 0.01 mg / kg; t = 3.89, P & Si besteetFigebam. 1B). Fir festzeleeën, wéi DAR-Subtype mat AMPH induzéiert CPP vermittelt, hunn mir entweder en D1-ähnlechen spezifeschen Antagonisten (SCH23390) oder en D2-ähnlechen spezifeschen Antagonist (Etikloprid) vir AMPH Injektiounen während der Konditioun geleet. D2-ähnlech Antagonismus blockéiert d'AMPH induzéiert CPP (t = 3.15, P <0.01 fir 0.5 mg / kg an t = 2.60, P <0.05 fir 5.0 mg / kg Etikloprid) awer Blockade vun D1-ähnlechen Rezeptoren eliminéiert AMPH-induzéiert CPP (Figebam. 1B), wat demonstriert datt den AMPH induzéiert CPP duerch Aktivatioun vun D1-ähnlechen, awer net D2-ähnlech Receptoren bei männlechen Prärievelen vermittelt gëtt.
AMPH Experience agesat Mating-induced Partner Preferenz Formatioun.
Obwuel d'AMPH induzéiert CPP néideg Aktivatioun vun D1-ähnlechen Receptoren (Figebam. 1B), hu mir virdru gezeechent datt d'Aktivatioun vun D1-ähnlechen Rezeptoren verhënnert mat Paquet-Bindungen (14). Dofir hu mir hypothetiséiert, datt d'AMPH-Pretreatment géif mat Paquet-induzéiert Paarverkleedung bei männlechen Prärievelen beweegen. Männer goufen an 4 Gruppen gedeelt, déi keng Injektiounen (intakt), Salinjektiounen oder Injections vu 1.0 oder 5.0 mg / kg AMPH fir 3 Deeg kréien (en Injektionsparadigm, deen genuch fir CPP indizéieren). Am véierten Dag sinn all Männer mat enger sexueller empfänger Weib fir 24 h gekoppelt an dann fir Partnerpräferenzen getest. Duerch déi bis virdrun studéiert (14, 25-27), intakt Männer a Männer déi Zalin fir Injektiounen fir 3 Deeg erhéicht hunn matenee matenee indirekte Partnerpräferenzen (intakt Männer; t = 3.05, P & Si besteet; 0.01, Salins heijen Männer; t = 3.21, P <0.01; Figebam. 2A). Allerdéngs sinn Männer, déi mat enger Dosis vun AMPH fir 3 Deeg virgeschloen waren, virum Corps net fonnt fir Partnerpräferenzen ze weisen (Figebam. 2A). Wichteg, d'AMPH-Virbereedung huet net mat enger Hetzelfreiwe während der Zesummeliewen (F(3, 26) = 0.26, P = 0.85; Figebam. 2B) oder Locomotor Aktivitéit während dem Préparatiounstest (F(3, 26)= 2.34, P = 0.10; Figebam. 2C), wat beweist datt den AMPH direkt mat passendéierter Partnerpräferenzen gestéiert goufen.
Figur. 2.
(A) No 24 Stonnen Bestietnis hunn intakt Männercher Partner-Virléiften ugewisen andeems se vill méi Zäit an der Säit-zu-Säit-Kontakt mat engem vertrautem Fra versus e komeschen weibleche verbréngen. Dës paring-induzéiert Partnerpréferenz gouf och vu Männercher ugewisen, déi 3 Deeg Virbehandlung mat Salz Salz kritt hunn. Wéi och ëmmer, 3 Deeg Virbehandlung mat AMPH bei 1.0 oder 5.0 mg / kg (Dosen AMPH déi induzéiert CPP) blockéiere paring-induzéiert Partnervirstellungen. Keng Gruppendifferenze goufen an der Frequenz vun de Parzellen ugestouss während den éischten 6 h vum Paring (B) oder an der Unzuel vun Cage Crossings während dem Partner Preferenze Test (C). **P <0.01.
AMPH Experience eleegt D1 Receptoren an der NAcc.
An datt d'AMPH-Exposé virgeschloen Partnerpréparenzen an d'AMPH induzéiert CPP (cf. uewen) a Paarmelen (14) Reguléiert duerch NAcc DA, hu mir hypotheschiséiert datt den AMPH eng mesolimbësch Drockschaltung bei männlechen Prärievelen änneren. Gehirn vun Themen aus dem sougenannten Verhalen Experimente goufen fir d'Situatioun vu situéiert Markéierter vu Marker mRNAs veraarbecht. Männer, déi mat AMPH (1.0 mg / kg) behandelt gi waren eng grouss Zounung am D1-Rezeptor (D1R; t = 3.06, P <0.01), awer net D2 Rezeptor (D2R), mRNA Etikettéiere bannent dem NAcc, am Verglach zu Männercher, déi Salins Virbehandlung kréien (Figebam. 3 A-C). Wéi och ëmmer, keng Gruppunterschiede goufen an der Dicht vu mRNA Etikettéiere fir Tyrosin Hydroxylase (TH), DA Transporter (DAT) oder D2Rs am ventralen Tegmentalgebitt (VTA) fonnt - d'Gehirregioun déi den primären dopaminergeschen Input fir den NAcc bitt (Figebam. 3 D-G). D'Erhéijung vun D1Rs an der NAcc gouf méi vu westleche Blott bestätegt (t = 1.90, P <0.05; Figebam. 3 H an I). Zesumme kënnen dës Donnéeën affichéieren, datt d'AMPH Expositioun Rezeptor- a Site-spezifesch Effekter op dem mesolimbic DA System vu männlechen Prärievelen erhéicht huet - de Niveau vun D1Rs am NAcc erhéijen.
Figur. 3.
Photo Biller déi situéiert Etikettéiere vu D1R (A) an D2R (B) mRNA am NAcc a caudate Putamen (CP) vu männleche Prairie Voles, déi ip Injektioune vu Salz oder AMPH (1.0 mg / kg) fir 3 Deeg krut. AMPH Behandlung erhéicht däitlech d'Dicht vun D1R, awer net D2R, mRNA am NAcc. Well dës Erhéijung gläichwäerteg iwwer den NAcc Kär a Schuel war, goufen Daten iwwer Subregiounen zesummegeklappt (C). Foto Biller déi mRNA Etikettéiere vun Tyrosin TH (D) illustréieren, DAT (E), an D2Rs (F) an der VTA vun der Prairie Vole Gehir. AMPH Behandlung huet net d'Dicht vun dësen DA Marker mRNAs an der VTA beaflosst (G). An der NAcc huet d'AMPH Behandlung d'Proteindichtheet vun D1Rs wesentlech erhéicht, awer net D2Rs, wéi gemooss duerch Western blotting (H an I). *P <0.05, **P <0.01. (Skala Bar, 1 mm.)
D1 Receptors am NAcc Mediate AMPH Impairment vun de Partner Präferenzen.
Mir hu virdru festgestallt, datt bei männlechen Prärievolen d'Aktivatioun vun D1Rs innerhalb der NAcc verhënnert d'Präferenz vun der Partnerschaft verhënnert (14), an déi aktuell Studie weist datt d'AMPH Exposition D1Rs am NAcc regelt (Figebam. 3). Dofir hu mir d'Hypothese gepréift, datt d'AMPH-induzéiert Beefort vu Partnerpréferenzen duerch D1Rs am NAcc vermittelt gëtt. Males krut eng stereotaksesch Kannnn, déi bilateral op der NAcc-Shell gedréckt ass (Figebam. 4A). Kënschtlech Cerebrospinal Flukt (CSF) alleng oder CSF mat verschidden Dosemänner vum D1-ähnlechen Rezeptor-Antagonist SCH23390 gouf bei der NAcc virgefaasst fir AMPH Injektiounen (1.0 mg / kg) während 3 Deeg vun der Konditioun. Duerno ginn Themen mat enger Fra fir 24 h gepëtzt an duerno fir Partnerpräferenzen getest. Wéi den Experimente virun (Figebam. 2), AMPH Exposure verhënnert mat matenee induzéiert Partnerpräferenzen bei Männer, déi intra-NAcc Injektiounen vu CSF oder enger gerénger Dosis vu SCH23390 (Figebam. 4B). Allerdéngs sinn Männer, déi mat enger héich Dosis vu SCH23390 (100 ng / kg) injizéiert sinn, affichéiert Partnervirbereedungen (t= 2.55, P <0.05), wat beweist datt D1R Blockade am NAcc d'AMPH-induzéiert Behënnerung vun der Partner Präferenzbildung eliminéiert huet (Figebam. 4B). Keen Gruppéierunterschiede goufen an der Paiementstëmmung während der Zesummeliewen oder der Locomotor Aktivitéit während dem Préiftentestpréifen fonnt.
Figur. 4.
(A) Een Fotobild a schematesch Zeechnungen, déi d'Injektiounsplaz an der NAcc vun der männlecher Prärie Vole Gehir. Illustréieren. Mir konzentréiere sech op d'NAcc Shell, well dës speziell Subregioun Mediander induzéiert Partnerpräferenzen vermittelt. (B) Männer, déi intra-NAcc Injektiounen vun CSF oder eng niddreg Dosis vun D1 Rezeptor Antagonist (SCH23390; 0.4 ng / Säit) virdru kritt hunn, ier AMPH Injektiounen hunn AMPH-Behënnerung vun de Partnervirstellungen ugewisen. Wéi och ëmmer, intra-NAcc Injektiounen vun enger héijer Dosis SCH23390 (100 ng / Säit) gerett paring-induzéierter Partnervirstellunge bei AMPH-behandelte Männercher. *P <0.05.
Diskussioun
An dëser Studie schwätzen mir eis fréier Findel datt d'AMPH Exposé indispenséiert CPP bei männlechen Prärievolen (22) a weisen datt d'D1R Aktivatioun am NAcc fir dëst Verhalensnout néideg ass, e Resultat mat de Studien an aner Nagetierarten (28). Dëse Findel, zesumme mat fréiere Studien, proposéiert datt verschidde verschidde DAEGER Mechanismen am NAcc regelen AMPH- a Partner-motivéiert Verhalen: AMPH-motivéiert Verhalen (CPP) gëtt duerch D1R vermittelt, woumat Partner-motivéiert Verhalen (Partnerpréparenzen) duerch D2R erliichtert ginn Aktivatioun a verhënnert d'D1R Aktivatioun an der NAcc (13-15). [Et ass wichteg ze bemierken datt an der NAcc D2R Aktivatioun Medikamenter indirekt CPP ënner bestëmmte Konditiounen vermittelt (29) an D1R Aktivatioun ass an aner sozial sozial motivéiert Verhalensbezeechnungen, wéi déi Leit, déi op Nofolger geregelt ginn (7, 30)].
Differenziell DAergic Regulatioun vun CPP a Partnerschaftsinformatioun gëtt am Wahrscheinlech erreecht duerch Differenzen am Grad vun der stimulus-evoked DA Konzentratioun déi verschidden DAR Subtypen aktivéieren. Duerch Differenz vun verbindlechen Affinitéite sinn robust Erhebungen bei der DA Konzentratioun néideg fir déi geréng Affinitéit D1Rs ze aktivéieren, während bescheidste Steigerungen an Däischter Konzentratioune präventiv héich Affinitéit D2Rs aktivéieren (31). An Raiber Voles, AMPH erënnert vill méi grouss Erhéijunge vun der DA Konzentratioun (24) am Verglach zu deem bewierkt duerch Paart (15, 25). Dës Donnéeën weisen datt relativ bescheide Leit an der DA Konzentraktioun bei sozialen Interaktiounen (15, 25) erméiglechen eng spezifesch Aktivatioun vun héich Affinitéit D2Rs an doduerch datt d'Paar-Bond-Formatioun erlaabt. Am Géigendeel wäerte sech d'Konzentratioun vun der DA mat der AMPH-Verwaltung staark erhéicht wahrscheinlech genuch fir d'geréng Affinitéit D1Rs ze aktivéieren an domat d'AMPH induzéiert CPP ze erliichteren.
D'Receptor-spezifesch Verhaltensregelung vu DA ass bestëmmend mat extrazellulären elektrophysiologeschen Studien an fräi Bewegungsrotten déi dës Medikamenter a natierleche Reize vu verschiddene neuronalen Populationen am NAcc veraarbecht ginn (32). Obwuel esou elektrophysiologeschst Studien net kënnen identifizéieren den Ënnertyp vun DA Rezeptoren ausdrécklech op eenzel Neuronen, an anatomesch Studien weisen datt d'NAcc aus Projete-Neuronen besteet, déi entweder D1Rs oder D2Rs mat ganz wéineg Koexpression uginn (33). Psychostimulanz aktivéiert intrazellulär Signaliergeweger no stroumdreem vun D1Rs (wéi duerch d'erhéite Phosphorylatioun vun Signalmolekülen festgeluecht) (34) a mir hu virdru gezeechent datt d'verstäerkte Aktivatioun vun dësen Signalpfaffungen d'Präferenz vun der Partnerschaft verhënnert (35). Dofir, obwuel d'Signal vun der DA bei der NAcc eng wichteg Roll an der Äntwert op d'AMPH an d'Bildung vu Partnerpräferien spillt, sinn dës Verhalensméiglechkeeten duerch verschidde Mikrokleederegelen vermëttelt ginn, déi striatal Projektiounssystemer besteet (33, 36). Dëst ass besonnesch besonnesch, well Paarmounebildung duerch Aktivatioun vun D2R-expriméiere Neuronen vermittelt gëtt, déi am preferentielle zum ventralen Pallidum projeten (33), eng aner Gehirregregioun wichteg fir Paarmelen (26).
An dëser Studie weisen mir Beweiser datt d'AMPH Erfahrung verhënnert mat Paarte Bindung. Wéi déi Preferenz Tester an dësen Experimenten no 48 h no der lescht AMPH Exposition (dh no der Medikamenter komplett metaboliséiert) gemaach goufen, proposéieren dës Daten eng persistent Auswierkunge vun AMPH op sozialem Bonding. Een potenziell Mechanismus, konsequent mat den Effekter vum AMPH an aner Arten (37, 38), duerch dat AMPH Frae vermëschen kann, ass e Paartbindung duerch d'Zuel vun der D1R Expression am NAcc. Dëse Begrëff gëtt duerch d'antagonistesch Roll vun NAcc D1Rs an der Weiderbildung vu Partnerschafft ënnerstëtzt (14, 24) a vun den aktuellen Donnéeën déi d'Rettung vu mating induzéiert Partner Präferenz vun intra-NAcc D1R Blockade an AMPH-behandelte Déieren demonstréieren (Figebam. 4). Interessanterweis hu mir scho virdru gesot datt bei männlechen Prärievelen d'Upregulatioun vu NAcc D1Rs no 2 Wochen vu Paarverband erméiglecht selektive Aggressioun géint konsuméiert Friemer, ënnert anerem sexuell empfänne Weibchen, a proposéiert datt dës neuresch Plastizitéit e evolutive Mechanismus ass, mat deem männlech Voles Erhale scho etabléiert Paire Obligatiounen (14). Déi aktuell Studie weist datt den AMPH kierstlech dës Neuroplastikitéit ausléift, wat zu AMPH-Impairement vun der Paarverkleedung féiert. Et ass och méiglech, datt AMPH-behënnert Männer d'Weiblech mat engem liiblen Zoustand vum AMPH-Austritt verbannen, an sou datt dës negativ Verband kéint d'AMPH-Impairement vun der Paarverkleedung ënnerleien. Eng virgeschriwwe Studie weist datt d'Entzug vu enger eskaléierend Dosiszeitung vun D-Amphetamin behënnert sexuell Verhalen an männleche Ratten (39). An eiser Studie hunn och Volen aus verschiddenen Behandlungsgruppen ähnlech Coupen aus dem Ausland manifestéiert (Figebam. 2B), wat beweist, datt et wahrscheinlech net an engem Zoustand vu Amphetamin war. Trotzdem ass dës Méiglechkeet méiglecherweis weider Ermëttlungen.
Et ass gutt festgestallt datt d'Drogen-induzéiert neural Plastizitéit fundamental ass fir Drogenubucht (40). Psychostimulanten änneren dramatesch Plastizitéit am mesolimbesche DA System (41) an et ass Beweiser fir ze proposéieren, datt sou Verännerungen méi an D1 auswierken, déi Neuronen ausdrécken (37). Ausserdeem hunn elektrophysiologeschst Studien weisen datt de Kokainwierkstudium de spéideren Neuroplastizitéit am NAcc reduzéiere kann (42). D'Drogen-induzéiert Neuralreorganiséierung vun der NAcc schwätzt d'natierlech natierlecht Neororganisation no der Romanescher Expositioun zu komplexe Ëmfeld (43). Dofir, obwuel Drogenubildung allgemeng als Unerkennung vu Léieren a Gedächtnis erkannt gëtt (1, 40, 44), et gëtt oft ënner Onregelméissegkeet, datt e medikament induzéierten Verlust vum Potenzial fir zousätzlech Verännerungen an mesolimbesche Circuit kann och essentiel sinn fir Sucht. Wéi eng Reduktioun vun der Plastiksitéit kann en Verhalen Repertoire op Drogenhënn limitéieren. Et ass also net verwonnerlech datt AMPH-behandelte Volen reduzéiert Paarméi Verhalen bewisen hunn. Déi aktuell Effekter vun der AMPH Expositioun op Paartbindung sinn konsistent mat fréiere Studien, déi de schlechte Effekter vu Psychostimulanzer op aner sozial Verhalen deelhuelen, och mat mëndlecht Verhalen (45-47) a sozial Spill (48-50). Zesumme ginn dës Aarbechten de Verspriechen, datt d'Untersuchung vu wéi Drogen a sozial Stimuli am Gehir eng interagéieren kënnen eist Verständnis vun de starke Interaktiounen tëschent sozialem Verhalen an Drogen an de Mënschen (21).
Materialien an Methoden
Sujet.
Themen waren sexuell naive männlech Prärievolen aus enger Laborzucht Kolonie. D'Themaen goufe bei 21 Deeg ageholl an an de gläichgeschlechtlechen Geschwëster Pärren an Plastikkäschten (12 × 28 × 16 cm) gebaut, wou Waasser a Liewensmëttel ad libitum waren. All Kéiers goufen ënner engem 14: 10 helleg donkel Zyklus ënnerhalen an d'Temperatur war ongeféier 20 ° C. All Sujeten waren ongeféier 90 Deeg vum Alter gepréift. Stereotaxesch Kaaftung a Site-spezifescher Infusioun vu DA Drogen goufen am Detail ënnerschiddlech beschriwwe (14).
Behavioral Testing.
CPPprüfung gouf wéi virdrun beschriwwen (22) mat den folgenden Ausnahmen. D'Initial Cage Präferenz fir all Sujet war an engem 30-Min prestest am Dag 1. D'Subjeten goufen an den 40 min Sessions geklongen, mat AMPH an de net ofgerappt Käfeg a Salzlinn op den bevorzugte Käfeg (amelwecht Dag, XPHXX h apart) fir 6 nach méi Deeg (Deeg 3-2). Duerno goufen Themen opgeruff (Posttest) fir d'Präsenz vun enger CPP am Dag 4.
Partnerpräisser Test gemaach gouf wéi virdrun beschriwwen (14). Kuerz gesot, de Testapparat besteet aus engem Zentralkäppchen (12 × 28 × 16 cm), deen duerch Hënn Röhren (7.5 × 16 cm) an zwee parallele identesch Kajele verbënnt, déi all Stierfhierentheeten hunn. D'Reizdéieren waren de vertrauten "Partner" (weiblechen Accord vum Thema) an en onbekannte "Fremdler" (eng Fra, déi net virdrun opgetrueden ass) déi an engem separaten Käfeg loosen ouni direkt Kontakter matenee gestouss waren. Bei der Initiatioun vum 3-h-Test waren d'Sujeten an den Zentralkäschte plazéiert an hunn fräi am ganze Apparat verschafft. D'Konfirmatioun gouf opgemaacht andeems en Zeil-Rousen Videoaufnahmesystem benotzt. D'Experimente si blann mam Manipulatioun iwwerpréift de Bands an de Verhalenssubjekter. Eng Partnerschaftsbezeechnung war definéiert wéi de Betreffend vill méi Zäit an enger Nopeschkontakt mat dem Partner wéi de Friemen, wéi e mat enger paarte Proben t Test (27).
In Situ Hybridiséierung an Western Immunoblotting.
Spezifesch Antisense Riboprobe (Table 1) goufen fir D1R, D2R, TH, a DAT an situ mRNA-Etikett benotzt. Etikettéiert gouf mat 35S-markéierter Sonden a méréieren d'mRNA Kontrollen fir all DA Markéierer wéi virdrun beschriwwen (51). Bei Western Blotting Analyse gouf DAR Protein aus dem Iwwerstand vu NAcc Tissue-Schlaggewieres extrahiert a bestëmmt wéi virdru beschriwen (52).
Table 1.
cDNA-Sonden fir den DA Marker mRNA-Etikettéieren am Prärie-vole Gehir
Daten Quantifizéierung an Analyse.
CPP a Partnerofänzerer waren festgeluegt mat paarte Proben t Tester. D'Gruppunterschiede bei de Coupden beim Patting beim éischte 6 h vun enger Paarung mat enger Fra an Käfeg Entreeën beim Préparatiounstest vun de Partner goufen analyséiert vun der ANOVA. D'optesch Densitéit vun der D1R- a D2R-mRNA-Etikettéierung an der NAcc an der TH, DAT a D2R mRNA-Etikettéierung am VTA goufen aus Autoradiogramm mat engem computeriséierte Imageprogramm (NIH IMAGE 1.64) quantifizéiert. D'Donnéeë goufen als prozedual Ännerung vum Mëttern vun der Saline Kontrollgruppe presentéiert an d'Gruppunterschiede analyséiert t Tester. Endlech waren optesch Densitéiten vun der D1R- a D2R-Markéierung op der Röntgenfilm aus den westlechen Blotsexperimenten analyséiert ginn duerch tTester.
Experimental Design.
Experiment 1a etabléiert eng Dosis-Reaktiounskurve fir AMPH induzéiert CPP. D'Themae goufen am CPP-Apparat am Dag 1 ugetruede gelooss, a random an eng vun sechs experimentelle Gruppen, déi ip (IP) Injektiounen vu Salz enthale goufen, déi verschidde Konzentraktioune vun AMPH [0 (n = 12), 0.1 (n = 8), 0.5 (n = 9), 1.0 (n = 12), 3.0 (n = 12), oder 5.0 mg / kg (n = 13)] während 3 Deeg (Dag 2-4) vun der Conditionéierung, an dann fir CPP an engem Posttest am Dag 5 gepréift.
Experiment 1b huet d'Rollen vun DA Rezeptoren am AMPH induzéiert CPP. D'Themae goufen an der CPP-Apparat ugedoen an an der Zufuhrung zu enger vun aacht Experimentalgruppen déi eng sc (sc) Injektioun vu Salzléisung kréien (n = 10) oder Salzlinn déi verschidde Konzentratioune vun engem net-selektive DA-Rezeptor-Antagonist [Haloperidol; 0.1 (n = 8), 1.0 (n = 8), oder 5.0mg / kg (n = 8)], oder e D1-ähnlechen spezifesche (SCH23390; 0.5 (n = 7) oder 5.0 mg / kg (n = 7) oder D2-spezifesch DA Rezeptor Antagonist [Etikloprid; 0.5 (n = 8) oder 5.0 mg / kg (n = 8)]. Drësseg Minuten spéit ass eng Schwelldosis vun AMPH (1.0mg / kg), déi de CPP am Experiment 1a induzéiert huet, fir AMPH Konditionnéiert benotzt. No 3 Deeg vun AMPH Conditionnel hunn all Sujeten en CPP-Posttest kritt.
Experiment 2 iwwerpréift ob d'AMPH Erfahrung mat Paart Bonding gestéiert gouf. Sujete ware onofhängeg an eng vun dräi experimentelle Gruppen, déi IP-Injektiounen vu Salzlack kréien (n = 8) oder Salze, deen 1.0 mg / kg enthält (n = 8) oder 5.0 mg / kg (n = 7) AMPH eemol pro Dag fir 3 Droitstagen - e Paradigmas deen de CPP bei männlechen Prärievelen induzéiert huet. Am véierten Dag hunn d'Sujete mat engem estrogen-präziden Fra fir 24 h gepackt (14), a wa si dann an engem 3-h Partnerpräisser Test getest. Fir d'Potenzial vun Injektiounen op Paartbonden ze kontrolléieren, eng véiert experimentell Grupp vu intakt Männer, déi keng Injektiounen krut (n = 6) war gepackt mat estrogen-véierter Weibchen fir 24 h an dunn fir Partnerpräferenzen getest. All Verhale vu Tester sinn videofilm fir d'Verifikatioun vum Matter. D'Dauer vun de Sujete bezeechentlech Kontakt mat dem Partner an dem Friemen sinn quantifizéiert. Ausserdeem goufen d'Frequenzen vum Coup mateneen an den éischten 6 h Paarung a Bewegungsaktivitéit (uginn mat Käfelechkrees) während dem 3-h Partnerpräferenzstest quantifizéiert. Nodeems de Préparatiounstest, d'Sujeten direkt gestuerwe waren. All Gehirn goufen gefruerert, gefroren op trockenem Eis an an -80 ° C fir d'In-situ Hybridiséierung Etikett vu DA Marker mRNAs.
Experiment 3 iwwerpréift ob d'AMPH-behënnerte Paarverkleedung mat Ännerungen an mesolimbic DA Aktivitéit ass. Brains vun de Sujeten déi Saline kréien (n = 8) oder 1.0 mg / kg AMPH (n = 8) am Experiment 2 goufen op engem Kryostat an Coronalschnëtt (14 μm Déck) geschnidden, déi op Superfrost / plus Dias (Fisher Scientific) opgebaut goufen. Brain-Sektioune bei 98-μm Intervallen hu fir d'In-situ Hybridiséierung-Etikettéiere vun D1R, D2R, TH, a DAT mRNAs veraarbecht. Well Volen, déi mat 1.0 mg / kg AMPH erreecht hunn, huet en D1R erhéicht, awer net D2R, mRNA-Etikettéierung am NAcc, am Verglach zu den salinéiert Injizéierter Kontrollen, goufen zwee zusätzlech Gruppen vun Sujeten erstallt, déi Injektiounen vu Salzlack hunn (n = 6) oder 1.0 mg / kg AMPH (n = 6), 24 h der Mataarbechter, an dann Partnerpräisser Test, wéi et hei beschriwwe gëtt. D'Themae goufen decapitéiert an d'Gehirer waren op engem Kryostat bei 300 μm Déck geschnitten. Tissue-Stëftung gëtt bilateral aus der NAcc geholl ginn fir D1R a D2R Western blotting veraarbecht ginn.
Experiment 4 iwwerpréift ob d'Aktivatioun vun D1-Typ Rezeptoren am NAcc war responsabel fir AMPH-Impairement vun der Paarbindung. D'Themae goufen implantéiert mat Guillem Cannulae bilateral fir d'NAcc-Shell. No 3 Deeg vun der Recuperatioun goufen se zoufälleg an ee vun dräi experimentelle Gruppen zugewuess, an denen se intra-NAcc Injektiounen vu CSF (200 nL / Side, n = 11), oder CSF mat 0.4 (n = 6) oder 100 Nga / Säit (n = 7) SCH23390. Drësseg Minuten spéit hunn si IP-Injektiounen vu 1.0 mg / kg AMPH. Dës Prozedur gouf op 3 däerfen noeneen Deeg opgedeelt. Am véierten Dag hunn d'Sujete mat enger estrogen-véierter Fra fir 24 h gepaart an dunn fir Partnerpräferenzen getest.