Ọrọ asọye: Iwuri pupọju… ninu ọran yii pẹlu amphetamine, eyiti awọn iṣan omi dopamine [D1] awọn olugba… ti ko darapọ imora ni awọn ibo abinibi pupọ.
Ti ṣatunṣe nipasẹ Leslie Lars Iversen, University of Oxford, Oxford, United Kingdom, ati ti a fọwọsi ni Oṣu kejila ọjọ 10, 2009 (ti o gba fun atunyẹwo Oṣu Kẹwa Ọjọ 21, 2009)
áljẹbrà
Voirigi ọkọ ofurufuMicrotus ochrogaster) jẹ ẹya ti o ni ibatan larinrin ti o dagba awọn asopọ lẹhin ti ibarasun, ihuwasi eyiti o jẹ ti dopamine aringbungbun (DA). Nibi, a lo awọn voir prairie ti akọ lati ṣe ayẹwo awọn ipa ti ifihan egbogi lori isunmọ bata ati awọn ibatan elegbe-ibatan. Ninu adanwo akọkọ wa, a ṣe ayẹwo ihuwasi iwuri amphetamine (AMPH) nipa lilo aye yiyan ipo (CPP) apẹrẹ ati pe a fihan lati wa ni ilaja nipasẹ ṣiṣiṣẹpọ ti awọn olugba D1-like DA. Nigbamii, a ṣe ayẹwo awọn ipa ti ifihan AMPH ti o tun ṣe lori isọdọmọ bata. Iwapọ ati iyo ṣe afihan awọn ọkunrin iṣakoso ibarasun han awọn ifẹ ibara ẹni ti o ṣe inunibini, lakoko ti awọn ọkunrin ṣe dibọn pẹlu AMPH ni awọn abere to munadoko lati jẹ ki CPP kuna lati ṣafihan awọn ayanfẹ alabaṣepọ ibarasun. Iru itọju AMPH yii tun ṣe alekun D1, ṣugbọn kii ṣe D2, ikosile olugba ninu awọn akopọ iṣan (NAcc). Pẹlupẹlu, idiwọ oogun elegbogi ti D1-like DA awọn olugba ni NAcc igbala awọn ibarasun ibarasun ẹlẹgbẹ-indu ni awọn ọkunrin ti o tọju itọju AMPH. Paapọ, data wa fihan pe ifihan ifihan AMPH ti o tun le dín atunyẹwo ihuwasi ti awọn ọkọ prairie akọ nipasẹ ẹrọ DA-receptor-kan pato ninu NAcc, eyiti o fa ijade ti dida asopọ apapọ.
O ti gba ni ibigbogbo ti awọn iwuri ati awọn ihuwasi ẹdun ti o ṣe igbelaruge amọdaju ni ofin nipasẹ Circuit ẹsan ọpọlọ pẹlu eto mesolimbic dopamine (DA) (1, 2). Botilẹjẹpe eto yii ni igbagbogbo jẹ mimu gbigbemi ounjẹ ati ihuwasi ibalopo (3, 4), o tun ti ni ipa ninu awọn ihuwasi iwuri iwa ti o ṣẹlẹ miiran, bii ere awujọ laarin awọn ọmọde ati isopọpọ awujọ laarin obi ati ọmọ (5-9). Nigbagbogbo a ko ṣe akiyesi ninu iwadi jẹ awọn asopọ awujọ ti o da laarin awọn agba agba, ie, awọn iwe ifowopamosi. Iwadii to ṣẹṣẹ nipa lilo iru ẹda ti o lawujọ lawujọ, igboro prairie (Microtus ochrogaster) (10-12), tọka pe nla pupọ ti ilana ilana iṣan ti o wa labẹ dida bata asopọ ati itọju waye laarin awọn ọgangan ọta arin (NAcc)13-15) —Awọn agbegbe ọpọlọ mesolimbic ti o ṣe pataki fun ilaja ihuwasi awọn iwa ihuwasi (1, 2, 16).
Biotilẹjẹpe awọn iṣọ iwuri iwuri wa lati ṣe igbelaruge ihuwasi imudara amọdaju bii ounjẹ, ibarasun, ati imopọ awujọ (1, 17), o jẹ ipalara si isọfunra atọwọda nipasẹ awọn oogun ti ilokulo (8). Fun apẹẹrẹ, iṣakoso ti awọn oogun psychostimulant ti ilokulo, bii kokenin ati amphetamine (AMPH), awọn abajade ninu awọn ayipada itẹramọle ti iṣẹ ṣiṣe mesolimbic DA (18, 19). Ipa ti o lagbara lori agbegbe yii nipasẹ awọn wọnyi ati awọn oogun afẹsodi miiran ni a daba lati dinku iye ti a rii ti awọn iwuri adayeba (20), pẹlu awọn ti iseda awujọ (8). Biotilẹjẹpe o jẹ mimọ pe awọn afẹsodi oogun n ṣafihan ihuwasi awujọ ti ko nira (21), ilana isedale ti awọn ibaraenisepo laarin iriri ti oogun ati isomọra awujọ ni oye ti ko dara. Eyi jẹ nitori, ni apakan, iru awọn ajọṣepọ bẹẹ ṣoro lati ṣe awoṣe ni awọn ọwọn iṣe adaṣe ti aṣa ti ko ṣe afihan isọdọkan awujọ laarin awọn alagba agbalagba.
Imọ-akọọlẹ neurode iru iru isopọ awujọ, ni pataki asopọ asopọ laarin awọn agbalagba, ni a ti kawe lọpọlọpọ ni okorin preri (10-12), ati laipẹ, a ti fi idi ẹda yii mulẹ bi awoṣe ṣiṣeeṣe lati ṣe ayẹwo iye iwuri ti AMPH (22). Pẹlupẹlu, iṣọpọ asopọ asopọ mejeeji ati AMPH iyipo ni ilaja, o kere ju ni apakan, nipasẹ DA gbigbe laarin NAcc (14, 15, 23). Nitorinaa, iwadi ti isiyi lo awoṣe prairie vole awoṣe lati fi idi idaniloju ihuwasi lati ṣe iwadi awọn ipa ti ifihan ifihan oogun lori isopọpọ awujọ ati lojutu lori eto ifaworanhan NAcc DA lati ṣafihan ẹrọ eekanna kan labẹ awọn ipa ihuwasi wọnyi.
awọn esi
Iduro Ipo Aṣayan AMPH-Induced (CPP) Ti wa ni Amẹrika nipasẹ DA ni Itọsọna Receptor-Specific.
Ibiyi ti CPP ni asọye nipasẹ ilosoke pataki ni akoko ti o lo ninu agọ ẹyẹ AMPH lakoko ifiweranṣẹ, lẹhin awọn ọjọ 3 ti ipo AMPH, ibatan si pretest. Bẹẹkọ awọn abẹrẹ-iyọ tabi iyọ-ara ti o ni awọn abẹrẹ meji ti o kere julọ ti AMPH ti ni idanwo (0.1 ati 0.5 mg / kg) awọn ayanfẹ ẹyẹ kaparọ (Eeya. 1A). Sibẹsibẹ, awọn ọkunrin ni majemu pẹlu awọn iwọn giga ti AMPH, pẹlu 1.0 (t = 2.87, P <0.01), 3.0 (t = 3.63, P <0.01), tabi 5.0 mg / kg (t = 3.03, P <0.01), ti han CPP (Eeya. 1A).
1 Fig.
(A) Awọn ọkunrin ti o gba awọn abẹrẹ ipara ti iyo tabi awọn iwọn kekere ti AMPH (0.1 tabi 0.5 mg / kg) lakoko awọn ọjọ 3 ti iṣe iṣe atẹjade ko fihan CPP. Sibẹsibẹ, awọn ọkunrin ni majemu pẹlu AMPH ni awọn iwọn lilo ti o ga julọ (1.0, 3.0, ati 5.0 mg / kg) lo akoko pupọ ni pataki ninu agọ ẹyẹ ti o ṣe pataki lakoko ifiweranṣẹ ju ti pretest lọ. (B) Lati ṣe idanwo ipa ti awọn olugba awọn olugba ni CPP-induced AMPH, awọn ọkunrin ni a ṣe pẹlu boya omi iyo awọn iwọn oriṣiriṣi ti kii ṣe yiyan antagonist DA nonselective (haloperidol), D1-like antagonist antagonist (SCH23390), tabi D2-like receptor antagonist (eticlopride ) ṣaaju ki awọn abẹrẹ AMPH lakoko awọn ọjọ 3 ti kondisona. Awọn abẹrẹ ti iyo tabi awọn iwọn kekere ti haloperidol ko paarọ CPP-induced AMPH. Sibẹsibẹ, haloperidol abẹrẹ ni 5.0 mg / kg dina CPP-induced AMPH, ṣafihan ilowosi ti awọn olugba DA ni AMPH-induced CPP. Pẹlupẹlu, awọn abẹrẹ ti D1-like antagonist ni iwọn kekere ati giga, ṣugbọn kii ṣe D2-like antagonist, ti dina mọ AMPH-induced CPP, ṣafihan ilana olugba-kan pato DA ti AMPH-induced CPP. *P <0.05, **P <0.01.
Nitori AMPH pọsi DA neurotransmission ni prairie voles (24), ati DA ṣe ajọṣepọ AMPH ni idaniloju ni awọn eya miiran (23), a ṣayẹwo ayewo DA olugba (DAR) atẹle ti CPP-induced CPP ni awọn voirie preirie akọ. Awọn koko-ọrọ ni a kọju ni iṣafihan CPP, mu pẹlu boya iyọ tabi iyọ-inu ti o ni awọn iwọn oriṣiriṣi ti kii ṣe yiyan DAR antagonist (haloperidol) ṣaaju ki awọn abẹrẹ AMPH (1.0 mg / kg) lakoko awọn ọjọ 3 ti iṣe iṣepo, lẹhinna ṣe idanwo fun CPP ni ifiweranṣẹ kan. Awọn akọle ti o ni itọju pẹlu iyo (t= 2.69, P <0.01) tabi iyọ ti o ni awọn abere meji ti o kere ju ti haloperidol (0.1 mg / kg; t = 3.62, P <0.01; 1.0 mg / kg; t = 3.89, P “Eeya. 1B). Lati pinnu iru DAR subtype mediates AMPH-indu ti CPP, a nṣakoso atẹle boya D1-like antagonist kan pato (SCH23390) tabi D2-like antagonist kan pato (eticlopride) ṣaaju awọn abẹrẹ AMPH lakoko kondisona. D2-like antagonism ko ṣe idiwọ CPP ti a ṣe fun AMPH (t = 3.15, P <0.01 fun 0.5 mg / kg ati t = 2.60, P <0.05 fun 5.0 mg / kg eticlopride) ṣugbọn idena ti awọn olugba D1-bi awọn imukuro AMP ti o ni ifisi CPP (Eeya. 1B), ṣafihan pe AMPH-induced CPP ti wa ni ilaja nipasẹ iṣẹ-ṣiṣe ti D1-like, ṣugbọn kii ṣe D2-like, awọn olugba ninu awọn voirie ọkunrin preirie.
AMPH Iriri Alters Mating-Induced Partial Precing Fọọmu.
Biotilẹjẹpe AMPH-indu CPP nilo imuṣiṣẹ ti D1-like awọn olugba ((Eeya. 1B), a ti ṣafihan tẹlẹ pe ṣiṣiṣẹpọ ti D1-like awọn olugba ṣe idilọwọ ibarasun ibaramu bata pọ (14). Nitorinaa, a ni ironu pe ironu AMPH yoo ṣe idiwọ pẹlu ibarasun bata ti o fa akọ tabi abo ni awọn ipo abuku ti akọ. Awọn ọkunrin ti pin si awọn ẹgbẹ mẹrin ti ko gba awọn abẹrẹ (adaṣe), awọn abẹrẹ iyọ, tabi awọn abẹrẹ ti 1.0 tabi 5.0 mg / kg AMPH fun awọn ọjọ 3 (apẹrẹ abẹrẹ ti o to lati fa fifọ CPP). Ni ọjọ kẹrin, gbogbo awọn ọkunrin pọ pẹlu obinrin ti ngba ibalopọ fun 24 h lẹhinna ṣe idanwo fun awọn ayanfẹ alabaṣepọ. Ni ibamu pẹlu awọn ẹkọ iṣaaju (14, 25-27), awọn ọkunrin to sunmọ ati awọn ọkunrin ti o gba awọn abẹrẹ iyo-iyọ fun awọn ọjọ 3 ṣaaju ki o to ibaramu fihan awọn ifẹ ibara ẹni lọwọ awọn ọkunrin (awọn ọkunrin to sunmọ; t = 3.05, P <0.01, awọn ọkunrin inin inine; t = 3.21, P <0.01; Eeya. 2A). Sibẹsibẹ, awọn ọkunrin ti a ṣe apẹrẹ pẹlu boya iwọn lilo ti AMPH fun awọn ọjọ 3 ṣaaju ki ibarasun kuna lati ṣafihan awọn ayanfẹ alabaṣepọ (Eeya. 2A). Ni pataki, ifilọlẹ AMPH ko ni ipa lori ibarasun ibarasun lakoko akoko gbigbepọ (F(3, 26) = 0.26, P = 0.85; Eeya. 2B) tabi iṣẹ iṣele iṣẹ lakoko idanwo ayanmọ alabaṣepọ (F(3, 26)= 2.34, P = 0.10; Eeya. 2C), nfihan pe AMPH taara interfe pẹlu awọn ifẹ ibarasun alabaṣiṣẹpọ.
2 Fig.
(A) Lẹhin 24 h ti ibarasun, awọn ọkunrin to sunmọ han awọn ayanfẹ ẹlẹgbẹ nipa lilo akoko pupọ pupọ ni ifọwọkan ẹgbẹ-si ẹgbẹ pẹlu iyawo ti o mọ si ati ajeji obinrin. Ayanfẹ alabaṣiṣẹpọ ibara-ẹni yii tun jẹ afihan nipasẹ awọn ọkunrin ti o gba awọn ọjọ 3 ti rilara bi iyọ. Sibẹsibẹ, awọn ọjọ 3 ti pretreatment pẹlu AMPH ni 1.0 tabi 5.0 mg / kg (awọn iwọn ti AMPH ti o fa ifunni CPP) ti dena awọn ayanfẹ ibarasun ibara ẹni. Ko si awọn iyatọ ẹgbẹ ti a ri ni iye igbohunsafẹfẹ ibarasun lakoko akoko 6 akọkọ ti ibarasun (B) tabi ni nọmba awọn irekọja ẹyẹ lakoko idanwo ifẹ ẹlẹgbẹ (C). **P <0.01.
Imọye AMPH ṣe afihan Awọn olugba D1 ni NAcc.
Funni pe AMPH preexposure ti bajẹ awọn ayanfẹ awọn alabaṣepọ ati awọn mejeeji AMPH-induced CPP (wo loke) ati asopọ asopọpọpọ (14) jẹ ofin nipasẹ NAcc DA, a ni imọran pe AMPH yoo paarọ pataki mesolimbic DA circuitry ni awọn ipo ọkọ ọkunrin. Awọn ọpọlọ ti awọn koko lati inu idanwo ihuwasi ti a mẹnuba loke ni a ṣe ilana fun fifi aami si ipo ti aami ami DAR m. Awọn ọkunrin ti a tọju pẹlu AMPH (1.0 mg / kg) fihan ilosoke pataki ninu olugba D1 (D1R; t = 3.06, P <0.01), ṣugbọn kii ṣe olugba D2 (D2R), aami mRNA laarin NAcc, ni akawe si awọn ọkunrin ti n gba itọju saline (Eeya. 3 A-C). Sibẹsibẹ, ko si awọn iyatọ ẹgbẹ ti a rii ni iwuwo ti aami mRNA fun tyrosine hydroxylase (TH), DA transporter (DAT), tabi D2R laarin agbegbe agbegbe ti iṣan (VTA) - agbegbe ọpọlọ ti o pese igbewọle dopaminergic akọkọ si NAcc (Eeya. 3 D-G). Ifihan ti o pọ si ti D1Rs ni NAcc ni idaniloju siwaju nipasẹ didasilẹ Iwo-oorun Iwọ-oorun (t = 1.90, P <0.05; Eeya. 3 H ati I). Paapọ, data wọnyi tọka pe ifihan AMPH ni olugba- ati awọn ipa-pato aaye lori eto mesolimbic DA ti awọn voirie akọ - n pọ si ipele ti D1Rs ni NAcc.
3 Fig.
Awọn aworan fọto ti o nfihan ni isami aami-aye ti D1R (A) ati D2R (B) mRNA ni NAcc ati caudate putamen (CP) ti awọn voirie prales ti o gba awọn abẹrẹ ipara ti iyo tabi AMPH (1.0 mg / kg) fun awọn ọjọ 3. Itọju AMPH ṣe pataki iwuwo iwuwo ti D1R, ṣugbọn kii ṣe D2R, mRNA ni NAcc. Nitori ilosoke yii jẹ deede ti o wa ni aarin mojuto NAcc ati ikarahun, awọn data dojuijako kọja awọn ipin (C). Awọn aworan fọto ti n ṣe apejuwe fifi aami si mRNA ti tyrosine TH (D), DAT (E), ati D2Rs (F) ni VTA ti awọn opolo prairie vole. Itọju AMPH ko ni ipa lori iwuwo ti awọn mRNA awọn aami bẹ ni VTA (G). Ninu NAcc, itọju AMPH ṣe alekun iwuwo amuaradagba ti D1Rs, ṣugbọn kii ṣe D2R, gẹgẹbi a ṣe idiwọn nipasẹ blotting Western (H ati I). *P <0.05, **P <0.01. (Pẹpẹ asekale, 1 mm.)
Awọn olugba D1 ni NAcc Mediate AMPH Ailagbara ti Awọn Ayanfẹ Alabaṣepọ.
A ti ṣafihan tẹlẹ pe, ni awọn voirie voles, mu ṣiṣẹ ti D1Rs laarin NAcc ṣe idiwọ idasile ayanmọ alabaṣepọ (14), ati iwadii lọwọlọwọ ṣafihan pe ifihan AMPH soke-n ṣe ilana D1Rs ni NAcc (Eeya. 3). Nitorinaa, a ni idanwo inu-inu pe ailagbara AMPH ti ailagbara ti awọn ayanfẹ alabaṣepọ jẹ ilaja nipasẹ D1Rs laarin NAcc. Awọn ọkunrin ti a gba cannulation stereotaxic ti o pinnu ifọkansi ni ikarahun NAcc (Eeya. 4A). Omi ara ti iṣan (CSF) nikan tabi CSF ti o ni awọn iwọn oriṣiriṣi ti D1-like receptor antagonist SCH23390 ni a fi sinu inu NAcc ṣaaju ki awọn abẹrẹ AMPH (1.0 mg / kg) lakoko awọn ọjọ 3 ti iloniniye. Lẹhin eyi, awọn koko-ọrọ ni a ti so pọ pẹlu obinrin kan fun 24 h lẹhinna ṣe idanwo fun awọn ayanfẹ alabaṣepọ. Bi pẹlu adanwo loke (Eeya. 2), Ifihan AMPH ṣe idiwọ awọn ibaramu alabaṣiṣẹpọ ibara ninu awọn ọkunrin ti o gba awọn abẹrẹ intra-NAcc ti CSF tabi iwọn kekere ti o kun fun SCH23390 (Eeya. 4B). Sibẹsibẹ, awọn ọkunrin ti a fi abẹrẹ pẹlu iwọn giga ti SCH23390 (100 ng / kg) awọn ayanfẹ alabaṣepọ ()t= 2.55, P <0.05), o n tọka pe idena D1R ni NAcc paarẹ aiṣedede ti AMPH ti iṣeto ayanfẹ ọrẹ (Eeya. 4B). Ko si awọn iyatọ ẹgbẹ ni a rii ni ibaramu ibarasun lakoko gbigbepọ tabi iṣẹ amọkọ lakoko idanwo ayanmọ alabaṣepọ.
4 Fig.
(A) Aworan aworan kan ati aworan iyaworan ti o n ṣe afihan aaye abẹrẹ ni NAcc ti ọpọlọ prairie vole. A ni idojukọ lori ikarahun NAcc nitori ipinya pato yi ṣe iṣedeede awọn ibarasun ibarasun alabaṣiṣẹpọ. (B) Awọn ọkunrin ti o gba awọn abẹrẹ iṣan-NAcc ti CSF tabi iwọn kekere ti antagonist olugba D1 (SCH23390; 0.4 ng / ẹgbẹ) ṣaaju ki awọn abẹrẹ AMPH ṣafihan ailagbara AMPH-ti awọn ayanfẹ alabaṣepọ. Sibẹsibẹ, awọn abẹrẹ intra-NAcc ti iwọn lilo giga ti SCH23390 (100 ng / ẹgbẹ) ti o gba awọn ayanfẹ ibarasun alabaṣiṣẹpọ ninu awọn ọkunrin ti o tọju AMPH. *P <0.05.
fanfa
Ninu iwadi yii, a ṣe apẹẹrẹ wiwa wa tẹlẹ pe ifihan AMPH ṣe ifunni CPP ni awọn voirie ọkunrin (prairie voles)22) ati ṣafihan pe ṣiṣiṣẹ D1R ni NAcc jẹ pataki fun ihuwasi yii, abajade ti o ni ibamu pẹlu awọn ijinlẹ ni awọn iru eeka miiran (28). Wiwa yii, papọ pẹlu awọn ẹkọ iṣaaju, daba pe iyatọ awọn ọna DAergic ni NAcc ṣe iṣakoso AMPH- ati awọn ihuwasi ti o ni itara alabaṣepọ: ihuwasi ti o ni itara AMPH (CPP) jẹ ilaja nipasẹ D1R, bi ihuwasi iwuri alabaṣepọ (awọn ayanfẹ alabaṣepọ) jẹ dẹrọ nipasẹ D2R ṣiṣiṣẹ ati dena nipasẹ ṣiṣiṣẹ D1R laarin NAcc (13-15). [O ṣe pataki lati ṣe akiyesi pe, ni NAcc, D2R activation mediates mediates CPP oogun egbogi labẹ awọn ipo kan (29) ati ṣiṣiṣẹ D1R ṣe alabapin ninu awọn ihuwasi ti awujọ miiran, gẹgẹbi awọn ti a tọka si iru-ọmọ (7, 30)].
Awọn ilana DAergic iyatọ ti CPP ati didaṣe ayanfẹ ikasi ẹni ni o ṣeeṣe julọ ti a waye nipasẹ awọn iyatọ ni iwọn ti ola-ti yọkuro DA fojusi DA ṣiṣẹ awọn oriṣiriṣi awọn ọna isalẹ DAR. Nitori awọn iyatọ ninu awọn abuda ti o ni ibatan, awọn igbega to lagbara ni ifọkansi DA ni a nilo lati mu D1Rs ṣiṣẹ pọ, lakoko ti awọn iwọn kekere ni awọn ifọkansi DA ṣe pataki ṣiṣẹ ibaramu giga D2Rs (31). Ni awọn voirie prairie, AMPH ṣe awari ọpọlọpọ awọn ilosoke nla ni ifọkansi DA ((24fiwewe si ipanu nipasẹ ibarasun (15, 25). Awọn data wọnyi daba pe irọrun iwọntunwọnsi ni iwọnba DA ni lakoko awọn ibaraenisọrọ ajọṣepọ (15, 25) gba iyasọtọ kan pato ti ibaramu giga D2Rs ati nitorinaa dẹrọ idasile asopọpọ bata. Lọna miiran, pọsi to lagbara ni ifọkansi DA ni atẹle iṣakoso AMPH o ṣeeṣe to lati mu D1Rs ibarasun kekere ṣiṣẹ, nitorinaa n ṣetọju CPP-induced AMPH.
Ilana ihuwasi Receptor-kan pato nipasẹ DA jẹ ibamu pẹlu awọn ijinlẹ electrophysiological extracellular ni awọn eku ọfẹ larọwọto ti o nfihan pe oogun ati awọn iwuri ti ẹda ni a ṣe ilana nipasẹ awọn olugbe neuronal iyatọ laarin NAcc (32). Biotilẹjẹpe iru awọn ijinlẹ electrophysiological ko lagbara lati ṣe idanimọ ipilẹ ti awọn olugba DA ti o han lori awọn neurons ti ara ẹni kọọkan, awọn ijinlẹ anatomical ṣe afihan pe NAcc jẹ ninu awọn neurons asọtẹlẹ ti o ṣalaye boya D1Rs tabi D2Rs pẹlu iṣọpọ ajọdun pupọ (33). Psychostimulants ṣaṣe ṣiṣiṣẹ ṣiṣẹ mu awọn ọna ami ifihan iṣan intracellular isalẹ isalẹ lati D1Rs (bi a ti pinnu nipasẹ pipọtọsi pọsi ti awọn ohun sẹẹli gbigbe).34) ati pe a ti ṣafihan tẹlẹ pe muuṣiṣẹ pọ si ti awọn ọna ami ifaworanhan wọnyi ṣe idilọwọ dida awọn ayanfẹ alabaṣepọ (35). Nitoribẹẹ, botilẹjẹpe DA gbigbe laarin NAcc ṣe ipa pataki ninu idahun si AMPH ati dida awọn ayanfẹ alabaṣepọ, awọn iṣe wọnyi ni o ṣee ṣe ilaja nipasẹ awọn microcircuit pato ti o ni awọn ọna ṣiṣe asọtẹlẹ asọ (33, 36). Eyi jẹ ti awọn anfani pato nitori dida asopọ asopọ batapọ ti wa ni ilaja nipasẹ didiṣẹ ti D2R-n ṣalaye awọn iṣan ti o ṣe ipinnu iṣaju si pallidum ventral (33), ẹkun-ọpọlọ miiran ti o ṣe pataki fun isopọmọ meji (26).
Ninu iwadi yii, a pese ẹri pe iriri AMPH ṣe idiwọ ibarasun bata ti o jẹ ibaramu. Bii awọn idanwo ayanfẹ ẹlẹgbẹ ninu awọn adanwo wọnyi ni a ṣe 48 h lẹhin ifihan AMPH ti o kẹhin (i.e., lẹhin ti oogun naa ti jẹ metabolized patapata), awọn data wọnyi daba ipa itẹramọṣẹ AMPH lori isopọpọ awujọ. Ẹrọ ti o ni agbara kan, ni ibamu pẹlu awọn ipa ti AMPH ni awọn eya miiran (37, 38), nipasẹ eyiti AMPH le ṣe idiwọ asopọ asopọ bata jẹ nipasẹ ilosoke ti ikosile D1R laarin NAcc. Imọye yii ni atilẹyin nipasẹ ipa antagonistic ti NAcc D1Rs ninu didaṣe ayanmọ alabaṣepọ (14, 24) ati nipasẹ data lọwọlọwọ ti n ṣafihan igbala ti ibarasun ibarasun indu nipasẹ intra-NAcc D1R blockade ninu awọn ẹranko ti a tọju AMPH (Eeya. 4). O yanilenu, a ti ṣafihan tẹlẹ pe, ninu awọn voles ọkunrin prales, ilana-igbesoke ti NAcc D1Rs lẹhin awọn ọsẹ 2 ti awọn asopọpọpọ ṣetọtọ ibinu yiyan si awọn alejo pataki, pẹlu awọn obinrin ti o ngba ibalopọ, ni iyanju pe ṣiṣu eleyii ti ara yii jẹ ẹrọ iṣelọpọ nipasẹ eyiti awọn voles ọkunrin ṣetọju awọn iwe ifowopamosi bata ti iṣeto tẹlẹ (14). Iwadi lọwọlọwọ daba pe AMPH artificially ṣe okunfa iṣan neuroplasticity yii, ti o yorisi si AMPH-aisi ti isopọmọ bata. O tun ṣee ṣe pe awọn ọkunrin ti o tọju itọju AMPH le ṣe akọpọ pẹlu obinrin pẹlu ipo iparọ ti yiyọ kuro AMPH, ati nitorinaa ajọṣepọ yii le ṣe ailagbara AMPH ti isopọmọ bata. Iwadi iṣaaju ti ṣafihan pe yiyọ kuro lati inu ilana iwọn lilo igbesoke ti d-amphetamine ti bajẹ ihuwasi ibalopọ ni awọn eku ọkunrin (39). Ninu ẹkọ wa, sibẹsibẹ, awọn voles lati oriṣiriṣi awọn ẹgbẹ itọju ti ṣafihan iru ibarasun ibarasun kannaEeya. 2B), n tọka pe o ṣee ṣe pe wọn ko si ni ipo yiyọ kuro ninu amphetamine. Bi o ti le ṣee ṣe, o ṣee ṣe nilo iwadii siwaju si.
O ti fidi mulẹ pe oogun irigiga nkan ti ara lilu jẹ ipilẹ si afẹsodi oogun (40). Psychostimulants paarọ bosipo igbekale ṣiṣu ni eto mesolimbic DA (41) ati ẹri wa lati daba pe iru awọn ayipada jẹ ifarada diẹ sii ni D1 n ṣalaye awọn iṣan iṣan (37). Pẹlupẹlu, awọn ijinlẹ electrophysiological ti fihan pe iriri kokeni le dinku neuroplasticity ti o tẹle laarin NAcc (42). Lootọ, isodi-atunto ti ara ti oogun ti NAcc ṣe iṣeeṣe atundapọ isedale atunto adani lẹhin atẹle ifihan ara si awọn agbegbe ti o nipọn (43). Nitorinaa, botilẹjẹpe afẹsodi ti oogun ni a gbawọ kaakiri bi ibajẹ ti ẹkọ ati iranti (1, 40, 44), o jẹ igbagbogbo ko ni oye pe pipadanu oogun ti oogun ti agbara fun afikun iyipada ni awọn iyika mesolimbic le tun jẹ pataki fun afẹsodi. Iru idinku ninu ṣiṣu le se idinwo iru iwa ihuwasi si kiko oogun. O jẹ Nitorina ko jẹ ohun iyanu pe awọn voles ti a tọju pẹlu AMPH ṣe afihan idinku ihuwasi asopọpọpọ ti dinku. Awọn ipa lọwọlọwọ ti ifihan AMPH lori isọdọmọ ni ibamu pẹlu awọn ẹkọ iṣaaju ti n ṣe afihan awọn ipa piparẹ ti psychostimulants lori awọn ihuwasi awujọ miiran, pẹlu ihuwasi iya45-47) ati ere ere ilu (48-50). Ni apapọ, iru iṣẹ pese ileri pe ayewo ti bii oogun ati awọn iwuri awujọ ṣe pọ si ọpọlọ le fa oye wa pọ si ti awọn ibaraenisọrọ to lagbara laarin ihuwasi awujọ ati lilo oogun ni awọn eniyan (21).
Awon nkan ise nkan ati awon ona lati se nkan
Koko-ọrọ.
Awọn koko jẹ akọ tabi abo ti o lalori lati ibalopọ lati ileto ibisi yàrá. A ti ya awọn koko-ọrọ ni awọn ọjọ 21 ti ọjọ ori ati gbe ni awọn arakunrin aburo kanna ni awọn apoti ṣiṣu (12 × 28 × 16 cm) nibiti a ti pese omi ati ounjẹ ni ipolowo libitum. Gbogbo awọn iho ni a ṣetọju labẹ 14 kan: 10 light-waree waree, ati iwọn otutu fẹẹrẹ to 20 ° C. Gbogbo awọn akọle jẹ nipa awọn ọjọ 90 ti ọjọ ori nigba idanwo. A ṣalaye ifaagun stereotaxic ati idapo pato-aaye ti awọn oogun DA ni apejuwe ni alaye ibomiiran (14).
Idanwo Ihuwasi.
Ayẹwo CPP ni a ṣe gẹgẹbi a ti ṣalaye tẹlẹ (22) pẹlu awọn imukuro wọnyi. Iyanyan agọ ẹyẹ ni ibẹrẹ fun koko kọọkan ni a ti pinnu ni pre XXX-min pretest ni ọjọ 30. Awọn koko lẹhinna ni majemu, lakoko awọn akoko minii 1, pẹlu AMPH si agọ ẹyẹ ti a ko ṣalaye ati iyọ si ẹyẹ ti o fẹ (mejeeji AMPH ati awọn abẹrẹ iyọ iyo ni a fun ni ọjọ kanna, 40 h yato si) fun awọn ọjọ itẹlera 6 (awọn ọjọ 3 – 2). Lẹhin eyi, awọn koko-ọrọ ni idanwo (posttest) fun wiwa ti CPP ni ọjọ 4.
Ṣiṣayẹwo ààyò ẹlẹgbẹ ni a ṣe bi a ti ṣalaye tẹlẹ (14). Ni ṣoki, ohun elo idanwo ti o jẹ ti ẹyẹ aringbungbun kan (12 × 28 × 16 cm) ti o darapọ nipasẹ awọn iho oniho (7.5 × 16 cm) si awọn kaadi idamo afiwe meji ti o jọra fun ile kọọkan ni ẹranko ti oninisi. Awọn ẹranko ti o funni ni “alabaṣepọ” ti o faramọ (iyawo ti koko-ọrọ) ati “alejo” ti a ko mọ tẹlẹ (abo ti ko tii pade koko-ọrọ tẹlẹ) ti o ni ifipamo larin awọn iho wọn lọtọ laisi ibatan taara si ara wọn. Ni ipilẹṣẹ ti idanwo 3-h, awọn koko-ọrọ ni a gbe sinu agọ ẹyẹ ati gba wọn laaye lati gbe larọwọto jakejado ohun elo naa. A gbasilẹ ihuwasi ni lilo eto gbigbasilẹ fidio akoko-laps. Awọn aṣayẹwo afọju si ifọwọyi naa ṣe ayẹwo teepu naa ati ihuwasi koko ti o gbasilẹ. A ṣalaye ààyò alabaṣiṣẹpọ gẹgẹbi inawo koko ni akoko pupọ ni akoko diẹ si ifọwọkan ẹgbẹ pẹlu alabaṣiṣẹpọ ju alejò naa, bi a ti tọka nipasẹ awọn ayẹwo ti o so pọ t idanwo (27).
Ni Situ Hybridization ati Western Immunoblotting.
Riboprobes alarun pataki ni pato (Table 1) ni a lo fun D1R, D2R, TH, ati DAT ni isamisi mRNA aarin wa. Labeling ti a waiye pẹlu 35Awọn ami idanimọ-S-aami ati awọn iṣakoso mRNA ori fun aami aami DA kọọkan bi a ti ṣalaye tẹlẹ (51). Fun atunyẹwo ifilọlẹ Iwọ-Oorun, a ti gbe amuaradagba DAR jade kuro ninu aibikita fun awọn iṣu ara ti NAcc ati ikọlu bi a ti ṣe ṣalaye tẹlẹ (52).
Table 1.
Awọn idanwo cDNA fun aami samisi mRNA ti o wa ninu ọpọlọ vole ọpọlọ prairie
Wiwa data ati Onínọmbà.
Awọn ayanfẹ CPP ati awọn alabaṣepọ ẹlẹgbẹ ni a ti pinnu nipasẹ awọn ayẹwo so pọ t awọn idanwo. Awọn iyatọ ẹgbẹ ninu awọn ijade ibarasun lakoko 6 h ti sisopọ pẹlu obinrin kan ati awọn titẹ sii ẹyẹ lakoko idanwo ẹlẹgbẹ alabaṣepọ ni a ṣe itupalẹ nipasẹ ANOVA. Awọn iwuwo opitika ti D1R ati D2R mRNA isamisi ni NAcc bi daradara bi TH, DAT, ati D2R mRNA aami ni VTA ni a ti ṣoki lati awọn eto autoradio nipa lilo eto aworan aworan iṣiro (NIH IMAGE 1.64). A gbekalẹ data bi iyipada ogorun ti itumọ ti ẹgbẹ iṣakoso iṣakoso iyo awọn iyatọ ẹgbẹ ni a ṣe atupale nipasẹ t awọn idanwo. Lakotan, awọn iwuwo opitika ti D1R ati aami Isamisi D2R lori fiimu x-ray lati awọn adanwo iwadii Iha iwọ-oorun ti ṣe atupale nipasẹ tidanwo.
Apẹrẹ Idanwo.
Iwadii 1a ti gbekalẹ iwọn-kan-ọna kika esi fun CPP-indu ti AMPH. Awọn koko-ọrọ ni a kọju si ohun elo CPP ni ọjọ 1, ti a pinpin laileto sinu ọkan ninu awọn ẹgbẹ onidanwo mẹfa ti o gba ip (ip) awọn abẹrẹ ti iyo ti o ni awọn ifọkansi oriṣiriṣi AMPH [0 (n = 12), 0.1 (n = 8), 0.5 (n = 9), 1.0 (n = 12), 3.0 (n = 12), tabi 5.0 mg / kg (n = 13)] lakoko awọn ọjọ 3 (ọjọ 2 – 4) ti kondisona, lẹhinna ṣe idanwo fun CPP ni ifiweranṣẹ lẹhin ọjọ 5.
Iwadii 1b ṣafihan awọn ipa ti awọn olugba DA ni CPP-induced AMPH. Awọn koko-ọrọ ni a kọju ni ohun elo CPP ati pinpin laileto sinu ọkan ninu awọn ẹgbẹ esiperimenta mẹjọ ti o gba abẹrẹ sc (sc) ti iyo (n = 10) tabi iyọ ti o ni awọn ifọkansi oriṣiriṣi ti antagonist DA nonselective antagonist [haloperidol; 0.1 (n = 8), 1.0 (n = 8), tabi 5.0mg / kg (n = 8)], tabi D1 kan bi-kan pato (SCH23390; 0.5 (n = 7) tabi 5.0 mg / kg (n = 7)] tabi D2-bii pato antagonist DA receptor antagonist [eticlopride; 0.5 (n = 8) tabi 5.0 mg / kg (n = 8)]. Iṣẹju ọgbọn iṣẹju lẹhinna, iwọn lilo ọna kan ti AMPH (1.0mg / kg), eyiti o ṣe ifilọlẹ CPP ni Idanwo 1a, ni a lo fun ipo AMPH. Lẹhin awọn ọjọ 3 ti ipo amọdaju AMPH, gbogbo awọn akọle gba iwe ifiweranṣẹ CPP kan.
Ṣiṣe ayẹwo 2 ṣe ayẹwo boya iriri AMPH ṣe idiwọ pẹlu ifunpọ bata. A pin awọn nkan laileto sinu ọkan ninu awọn ẹgbẹ esiperimenta mẹta ti o gba awọn abẹrẹ ipara ti iyo (n = 8) tabi iyọ ti o ni 1.0 mg / kg (n = 8) tabi 5.0 mg / kg (n = 7) AMPH lẹẹkan fun ọjọ kan fun awọn ọjọ itẹlera 3 — apẹrẹ kan eyiti o jẹ ki o jẹ ki CPP wa ni awọn ipo iṣọ akọ. Ni ọjọ kẹrin, awọn nkan ni o so pọ pẹlu obinrin estrogen-primed fun 24 h (14), ati pe lẹhinna ni idanwo ni idanwo ayanfẹ alabaṣepọ 3-h. Lati ṣakoso fun awọn ipa ti o pọju ti awọn abẹrẹ lori isunmọ bata, ẹgbẹ idanwo esi kẹrin ti awọn ọkunrin abinibi ti ko gba eyikeyi awọn abẹrẹ (n = 6) ni a so pọ pẹlu awọn obinrin estrogen-primed fun 24 h ati lẹhinna ṣe idanwo fun awọn ayanfẹ alabaṣepọ. Gbogbo awọn idanwo ihuwasi ni a fun ni fidio-fun fidio fun ijẹrisi ibarasun. Iye akoko ti awọn koko-ọrọ ni ifọwọkan ẹgbẹ pẹlu alabaṣiṣẹpọ ati alejò ni a ti ṣalaye. Ni afikun, awọn loorekoore ti awọn ijalẹ ibarasun lakoko akoko 6 h ti papọ ati iṣẹ adaṣe (itọkasi nipasẹ agọ ẹyẹ-kọja) lakoko idanwo ayanmọ alabaṣepọ 3-h. Lẹhin idanwo ayanfẹ alamọ, awọn koko-ọrọ ni a pa lẹsẹkẹsẹ. Gbogbo awọn opolo ni a ti kore, ti o tutu lori yinyin gbigbẹ, ati ni fipamọ ni −80 ° C fun ni aami fifa hybridization ti o wa ti DA marker mRNAs.
Ṣiṣe ayẹwo 3 ṣe ayẹwo boya adehun asopọ batapọ AMPH ti ko ni ibamu pẹlu awọn ayipada ninu iṣẹ mesolimbic DA. Awọn ọpọlọ lati awọn iṣẹ ti o gba iyo-iyo (n = 8) tabi 1.0 mg / kg AMPH (n = 8) ni Aṣayan 2 ni a ge lori cryostat sinu awọn abala iṣọn-ara (sisanra 14 μm) ti o rọ pẹlẹpẹlẹ si Superfrost / plus awọn ifaworanhan (Ijinlẹ Fisher). Awọn apakan ọpọlọ ni awọn aaye arin 98-μm ni a ṣe ilana fun ni aami ifamisi isa-wiwọn aaye ti D1R, D2R, TH, ati DAT mRNA. Nitori awọn voles ti o ni iriri pẹlu 1.0 mg / kg AMPH ṣe afihan ilosoke ninu D1R, ṣugbọn kii ṣe D2R, iṣmiṣ mRNA ni NAcc, bi a ṣe afiwe si awọn iṣakoso ifun-iyo, awọn ẹgbẹ afikun meji ti awọn koko ti ipilẹṣẹ ti o gba awọn abẹrẹ ti iyo (n = 6) tabi 1.0 mg / kg AMPH (n = 6), 24 h ti ibarasun, lẹhinna idanwo idanwo ayanfẹ alabaṣepọ, bi a ti salaye loke. Awọn koko-ọrọ jẹ didin ati awọn opo ti a ge lori cryostat ni sisanra 300 μm. Awọn pisitikisi ika ẹsẹ lẹẹkọọkan ti o ya lati NAcc ni a ṣe ilana fun D1R ati D2R Western blotting.
Ṣiṣe ayẹwo 4 ṣe ayẹwo boya ṣiṣiṣẹ ti awọn olugba-iru awọn olugba D1 ni NAcc jẹ lodidi fun AMPH-ailagbara ti asopọ asopọ bata. Awọn koko-inu ni a tẹ pẹlu ifilọ cannulae bilaterally ti o fojusi ni ikarahun NAcc. Lẹhin awọn ọjọ 3 ti imularada, wọn pin laileto sinu ọkan ninu awọn ẹgbẹ idanwo ti o wa ninu eyiti wọn gba awọn abẹrẹ inu-NAcc ti CSF (200 nL / ẹgbẹ, n = 11), tabi CSF ti o ni 0.4 (n = 6) tabi 100 ng / ẹgbẹ (n = 7) SCH23390. Awọn iṣẹju ọgbọn lẹhinna, wọn gba awọn abẹrẹ ipọn ti 1.0 mg / kg AMPH. Ilana yii tun ṣe fun awọn ọjọ itẹlera 3. Ni ọjọ kẹrin, awọn nkan ni o so pọ pẹlu obinrin ti estrogen-primed fun 24 h ati lẹhinna ṣe idanwo fun awọn ayanfẹ alabaṣepọ.